Актер родился 17 ноября 1957 года в немецком Потсдаме. Он учился в Московском институте электронной техники, но через три года ушел в Школу-студию МХАТ, курс Олега Ефремова. После окончания Школы он начал там преподавать актерское мастерство.
В 2015 году выпускной курс МХАТ, который называли "Мастерской Дмитрия Брусникина", в полном составе приняли в Московский драматический театр "Человек". А режиссер стал заместителем художественного руководителя этого театра. В 2018 году Брусникина назначили директором Экспериментального театрального центра новой драмы "Практика". "Мастерская Дмитрия Брусникина" вошла в труппу театра.
Известен актер и своими ролями в кино и сериалах. В частности, он снялся в таких сериалах, как "Петербургские тайны", "Марш Турецкого", "Сыщики" и "Досье детектива Дубровского". Он также выступил режиссером эпизодов "Сыщиков", снял сериалы "Ищейка" и "Бигль", а также ленту "Счастье по рецепту".